用途:用于金黃色葡萄球菌的顯色培養,金黃色葡萄球菌顯藍綠色
金黃色葡萄球菌顯色培養基 (RFP) 用于食品、水、牛奶、冰激凌和肉制品中金黃色葡萄球菌的快速檢測。符合 SN 標準、 GB 標準和 ISO 標準,金黃色葡萄球菌顯灰黑色,其外圍有一不透明沉淀環。由于本培養基中已含有免血漿,在 24-48 小時可以確定結果,無需進行確證試驗,可以用于金黃色葡萄球菌的計數或分離培養,是一種很理想的快速檢測培養基。
成份 (g/L)
改良 BP 基礎 | 48.0 |
瓊脂 | 10.0 |
pH 7.0 ± 0.2 25 ℃ |
RFP 添加劑: 30 瓶 *5ml
此配方可以進行改良或增加營養成份以獲得*佳的結果。
注意
此培養基僅供實驗室使用。
用法
稱取本品 2.0g 加入 28ml 蒸餾水, 121 ℃ 高壓** 15 分鐘。放置 50 -55 ℃ 水浴鍋中 冷至50 -55 ℃ 左右時,加入1 瓶已溶解好的 RFP 添加劑 ( 可在 60 -80 ℃ 溫度下10-20 秒快速溶解 ) ,混勻,樣品可采用傾注法或表面劃線法或涂布法進行金黃色葡萄球菌的檢測。
RFP 添加劑的溶解:打開瓶蓋,加入 5ml 無菌蒸餾水在無菌條件下溶解,注意動作不要太劇烈。在 37 ℃ 10 分鐘內可以完全溶解 ( 或在 60 -80 ℃ 溫度下10-20 秒快速溶解 ) 。
貯存
制備好的平板可保存 2-5 天,應避免光線直接照射。干燥培養基應放置于陰暗干燥處, 保存溫度 2-8 ℃,注意避光保存。
失效
干燥培養基超過保質期、結塊和顏色變化都不能使用。
操作步驟
1、按國家標準、 SN 標準、 ISO 標準或其它方法制備樣品液;
2、取 1ml 適宜稀釋度的樣品液加入無菌平皿中心,每個稀釋度取 2 個平皿 ;
3 、傾入 10-15ml 冷至 48 ℃ 左右的 BP 基礎培養基到平皿中,混勻 ;
4 、培養基凝固后,放置培養箱 37 ± 1 ℃ 培養 18-24h ,典型的金黃色葡萄球菌為灰黑色菌落,其外圍有一不透明圈,如果沒有典型菌落出現,再培養 18-24 小時;
5 、計數所有外圍有一不透明圈的菌落,無需進行確證試驗。
注意:也可以用涂布法或劃線法。
質量控制
1 、外觀
此干燥培養基的粉末均勻,具有良好的流動性,呈淡黃色。制備好的平板呈白色半透明固體培養基。
2 、微生物試驗
在 36 ± 1 ℃培養 24 ~ 28h 小時:
質控菌株 | ATCC | 生長情況 | 菌落顏色 | 不透明環 |
單增李氏菌 | 27853 | + | 無色 | - |
金黃色葡萄球菌 | 25923 | +++ | 灰黑色 | + |
表皮葡萄球菌 | | +++ | 灰黑色 | - |
沙門氏菌 | | -/+ | 無色 | - |
大腸桿菌 | | -/+ | 無色 | - |
方法的局限性
本培養基用于直接鑒定金黃色葡萄球菌,如果在 18-24 小時沒有出現典型菌落,需再培養 18-24 小時。有時金黃色葡萄球菌不顯灰 黑色 ,但其 外圍有一不透明圈。
典型特征
典型的金黃色葡萄球菌為灰黑色菌落,其外圍有一不透明圈。
參考文獻
1、Beckers H. J., van Leusden F. M., Hogeboom W. M. and Delfgon-van Asch E. H. M. (1980) (English summary) De Ware(n)-Chemicals 10 . 125-130.
2、 Beckers H. J., van Leusden F. M., Bindshedler O. and Guerraz D. (1984) Can. J. Microbiol. 30. 470-474.
3、 Baird-Parker A. C. (1962) J. Appl. Bacteriol. 25. 12-19.